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fecha= 02/12/2022

cultivo líquido 2

micelio = clonación desde placas miceliadas de golden teacher, mazapetec y mckenna.

recetas cultivo líquido

receta 1: malta y dextrosa

* 1/2L agua destilada * 1 cucharada de extracto de malta * 1 cucharada de extracto de dextrosa * 1 pizca de gypsium

receta 2: malta, dextrosa y extracto de sustrato

* 400mL agua destilada * 100mL de extracto de sustrato * 1 cucharada de extracto de malta * 1 cucharada de extracto de dextrosa * 1 pizca de gypsium

*nos han salido 3 botes de cada medio

procedimiento

*mezclar los ingredientes con el agua.

*hemos transpasado la mezcla a los botes y los hemos esterilizado en la olla a presión (25 min aprox).

*material para la inoculación:

* 1 jeringa estéril * 1 bote con agua esterilizada * los botes con el medio de cultivo

*hemos trabajado en una mesa con dos mecheros bunsen

*antes de inocular hemos oxigenado el medio de cultivo removiendo los botes

*hemos rellenado las jeringas de 5ml de agua esterilizada

*hemos inyectado 1ml de agua en la placa petri y raspado el micelio para que trocitos se desprendan en el medio

*hemos succionado el agua con los trocitos de micelio y la hemos inyectado en los botes a través del tapón de goma, teniendo cuidado a esterilizar la aguja y las superficies de contacto con alcohol

*NOTAS:

* ojo a no superar el 4% de azúcares en el medio de cultivo * no mojar el filtro de los botes

observaciones *el medio de cultivo contiene muchos sedimentos. por ahí se puede filtrar para que éstos no se puedan confundir con el micelio y mejorar la observación de su crecimiento? *al raspar el micelio con la jeringa la aguja tiende a taponarse. mejor raspar muy superficialmente para que no se desprenda el agar y tapone la aguja. romper el micelio lo más posible. *vamos a intentar mantener una temperatura de 26ºC para la incubación del micelio. vamos a usar el método de esterilla de calor y caja con agua.