**||||||||||||||||||| exp CL021222 |||||||||||||||||||||**\\

**fecha=** 02/12/2022\\

**cultivo líquido 2**\\

**micelio =** clonación desde placas miceliadas de golden teacher, mazapetec y mckenna. \\

**recetas cultivo líquido**\\

**receta 1: malta y dextrosa**\\

* 1/2L agua destilada 
* 1 cucharada de extracto de malta
* 1 cucharada de extracto de dextrosa
* 1 pizca de gypsium

**receta 2: malta, dextrosa y extracto de sustrato**\\

* 400mL agua destilada 
* 100mL de extracto de sustrato
* 1 cucharada de extracto de malta
* 1 cucharada de extracto de dextrosa
* 1 pizca de gypsium

*nos han salido 3 botes de cada medio

**procedimiento**\\ 

*mezclar los ingredientes con el agua.  

*hemos transpasado la mezcla a los botes y los hemos esterilizado en la olla a presión (25 min aprox). 

*material para la inoculación:

* 1 jeringa estéril
* 1 bote con agua esterilizada
* los botes con el medio de cultivo

*hemos trabajado en una mesa con dos mecheros bunsen

*antes de inocular hemos oxigenado el medio de cultivo removiendo los botes

*hemos rellenado las jeringas de 5ml de agua esterilizada

*hemos inyectado 1ml de agua en la placa petri y raspado el micelio para que trocitos se desprendan en el medio

*hemos succionado el agua con los trocitos de micelio y la hemos inyectado en los botes a través del tapón de goma, teniendo cuidado a esterilizar la aguja y las superficies de contacto con alcohol

*NOTAS: 

* ojo a no superar el 4% de azúcares en el medio de cultivo
* no mojar el filtro de los botes

**observaciones**
*el medio de cultivo contiene muchos sedimentos. por ahí se puede filtrar para que éstos no se puedan confundir con el micelio y mejorar la observación de su crecimiento?
*al raspar el micelio con la jeringa la aguja tiende a taponarse. mejor raspar muy superficialmente para que no se desprenda el agar y tapone la aguja. romper el micelio lo más posible.
*vamos a intentar mantener una temperatura de 26ºC para la incubación del micelio. vamos a usar el método de esterilla de calor y caja con agua.